INTRODUÇÃO
Atualmente com o advento tecnológico e científico da área biomédica e tendo em vista as questões relacionadas ao bem estar animal e as questões éticas na criação e manutenção de animais de laboratório, a prevalência da alta taxa de morbidade e de incidência de doenças crônicas, bem como a falta de estudos ou informações epidemiológicas em caprinos mantidos como animais de laboratório, é cada vez mais necessária a monitoração do rebanho. É comum em caprinos mantidos em condições semi-estabuladas o aparecimento de doenças diversas tais como anemias, diarréias, infestações por endo e ectoparasitos bem como o surgimento de doenças crônicas1. O Centro de Criação de Animais de Laboratório (CECAL), Unidade técnica de apoio da Fundação Oswaldo Cruz em parceria com Bio-Manguinhos assume o seu papel estratégico como Unidade do governo na área da saúde pública e bem-estar social, ao manter animais inoculados com imunoglobulinas diversas com o intuito de fornecer soro para a fabricação de kits de diagnósticos para Dengue, Leptospirose e Leishmaniose humana e canina, utilizados em saúde pública . Dentro deste contexto e em função de cabras serem mais sensíveis às alterações do hemograma, o presente estudo teve por objetivo verificar o perfil hematológico, bioquímico e parasitológico, bem como se os procedimentos executados nos protocolos de inoculação de imunoglobulinas e de sangria ocasionaram algum tipo de alteração dos resultados das cabras inoculadas com imunoglobulinas mantidas no Pavilhão de Animais de Médio e Grande Porte (PAMGP), do Departamento de Produção Animal (DAP), do Centro de Criação de Animais de Laboratório (CECAL) da Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ), Rio de Janeiro.
MATERIAL E MÉTODOS
O Procedimento de sangria foi realizado uma vez por mês. São retirados cerca de 600mL de sangue de cada animal em frascos de vidro previamente esterilizados por autoclave, para obtenção de soro. Todos os animais são microchipados para controle individual evitando assim que o mesmo animal seja submetido ao procedimento de sangria em duplicidade. Para o presente estudo foram colhidas amostras do sangue e das fezes de 14 cabras mantidas no PAMGP/DPA/CECAL. As amostras do sangue foram coletadas da veia jugular e acondicionadas em microtubos para hematologia com EDTA-K3 (MiniCollect® Greiner Bio-one Brasil), comerciais, estéreis com capacidade volumétrica de 1,0mL e microtubos para sorologia com ativador de coágulo (MiniCollect® Greiner Bio-one Brasil), comerciais, estéreis com capacidade volumétrica de 1,0mL. . As fezes coletadas com luvas estéreis diretamente do reto e acondicionadas em frascos estéreis. Para análise bioquímica as amostras foram centrifugadas por quinze minutos a 1600g com posterior separação do soro e acondicionadas em microtubos específicos para analise automatizada. Para os exames hematológicos as amostras foram coletadas direto do próprio tubo e aplicado diretamente no equipamento hematológico automatizado, Para a realização do hemograma foi utilizado o equipamento VET-ABC® que possui um sistema hidráulico completamente comandado por computador principal através de uma interface microprocessada. Este sistema hidráulico é responsável por aspirar um volume conhecido da amostra, dispensar diluentes de contagem e lise, lavar as agulhas de amostragem entre as diferentes operações e drenar volumes pré-estabelecidos das amostras diluídas para os respectivos blocos de contagem. O equipamento utiliza métodos baseados na variação da impedância gerada pela passagem das células diluídas em um diluente eletrolítico através de micro orifícios calibrados (parâmetros de contagem das células e determinação do hematócrito), determinação espectrofotométrica após lise das células vermelhas com diluente contendo ferricianeto e cianeto de potássio (parâmetros de dosagem de hemoglobina). O equipamento requer 12 ml de sangue total e é capaz de realizar análises completas a uma taxa de 42-45 amostras por hora de funcionamento, e está programado para a análise hematológica automática de Caprinos. O VET-ABC® analisa a cada ensaio os seguintes parâmetros a partir de 12 ml de sangue total: Contagem de glóbulos brancos (WBC), contagem de glóbulos vermelhos (RBC), contagem de plaquetas (PLT), dosagem de hemoglobina (HGB), determinação do hematócrito (HCT), e calcula o volume celular médio (MCV), a hemoglobina corpuscular média (MCH) e a concentração média de hemoglobina corpuscular (MCHC). São utilizados controles com altos, normais e baixos valores (Minotrol) na rotina diária do equipamento como controle de qualidade interno. Os valores normais preconizados para cada espécie animal são inseridos no equipamento através de cartões inteligentes antes da análise do material. Estes cartões guardam as informações específicas sobre cada espécie animal e servem de referência na interpretação e emissão do resultado final. Estes valores são passíveis de ajuste em função de características específicas dos animais analisados no laboratório e muito úteis no caso de situações especiais ligadas a sublinhagens de animais, permitindo criar perfil compatível com idade do animal ou para projetos onde os parâmetros hematológicos estejam alterados7. Os Exames bioquímicos foram realizados utilizando-se equipamento VITROS 750 XRC (Johnson & Johnson) calibrado para exame em caprinos. Com as amostras das fezes, foram feitos exames coprológicos individuais, pelo Método de Dennis ,Stone e Swanson (sedimentação) e Método de Willis-Mollay (flutuação). Os resultados foram analisados estatisticamente, considerando a média aritmética dos dados analisados, a moda, a variância e o desvio-padrão.
RESULTADOS E DISCUSSÃO
Os valores hematológicos foram de hemáceas (10,1 ± 3,0) milhões/mm3, hemoglobina (8,0± 1,7g/dL) hematócrito (22,1± 2,2%) e leucócitos de (10,1 ± 3,0±)x103 cells/mL. Os valores estabelecidos para a bioquímica sérica foram: Glicose (50,5 ± 7,5) mg/dL, Uréia (50,0 ± 2,6) mg/dL, Creatinina (1,2± 0,2) mg/dL, Acido úrico (0,2 ± 0,0)mg/dL, Bilirrubina total (0,6 ± 0,3)U/L; AST (119,8 ± 1,5) U/L ; ALT (46,1 ± 4,0)U/L; Creatina quinase (211,0 ± 12,2)g/dL; Proteínas totais (8,3 ± 0,6) g/dL; Albumina (2,9 ± 0,4), Fósforo (7,4 ± 0,9)mg/dL, Fosfatase alcalina (225,8 ±307,2) IU/L, Colesterol (81,3 ± 16,1)mg/dL. Os exames parasitológicos evidenciaram Nematódeos do Gênero Strongyloides, Protozoário do gênero Entamoeba e Coccídeo do Gênero Eimeria. Os resultados encontrados para os valores hematológicos estão abaixo do preconizado para caprinos3,4,5. Tal fato pode se basear na inoculação das cabras que poderiam simular um estimulo semelhante a uma doença crônica que muitas vezes segundo a literatura é causa freqüente de anemia em cabras3,4,5,6. Vale ressaltar que este resultado não acarretou em interferência na imunidade das cabras no que tange a produção dos kits de diagnóstico e que os animais não apresentavam alterações clínicas ou semiológicas que justificassem estado patológico. Os resultados da bioquímica sérica se encontravam dentro do preconizado pelos autores e não apresentaram alterações dignas de nota. O exame parasitológico apesar de se esperar negatividade estava dentro do preconizado para os principais agentes etiológicos de parasitoses em caprinos e servirá de referência para um melhor controle parasitário do rebanho3,4,5,6. Os valores da escala relatados aqui confirmam relatórios precedentes para cabras, mesmo que alguns autores relatem valores mais altos.
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